元昕實業有限公司
臺北市信義區松德路74號9樓
gentleMACS™ Perfusion Technology
傳統灌注方式複雜且繁瑣,創新的自動化 gentleMACS 灌注技術,搭配小鼠和大鼠肝臟灌注試劑盒,可以自動化的從囓齒動物肝臟中提取活肝細胞懸浮液。細胞後續可用於下游應用,例如細胞分離、細胞培養和細胞或分子分析。
組織灌注在 gentleMACS Octo Dissociator with 加熱器上進行,該加熱器配備了 gentleMACS 灌注套管和 gentleMACS 灌注器。囓齒動物肝臟組織使用肝臟灌注試劑盒、小鼠和大鼠的成分進行酶消化,在灌注過程中鬆動組織中細胞外基質的結構完整性。之後,使用帶加熱器的 gentleMACS Octo Dissociator 和 gentleMACS C 管對灌注組織進行短暫的機械破壞,從而將單細胞從組織中釋放出來。然後將樣品經過 MACS® SmartStrainer 100um 細胞網篩過濾,從單細胞懸浮液中去除任何剩餘的較大顆粒。此酵素配方可提高肝細胞產量且保留大部分細胞表面抗原結合位,有利於後續流式細胞術表型分析以及其他功能、遺傳或蛋白質組學研究。
這套方法方便、易於使用且自動化的從囓齒動物肝臟中提取活肝細胞,以獲得可重複的結果。告別繁瑣複雜的灌注方法,將 gentleMACS 灌注技術帶入您的實驗室!
原廠操作影片:
相關產品資訊:
貨號
品項
包裝
儀器
130-096-427
gentleMACS Octo Dissociator with Heaters
儀器配件
130-128-752
gentleMACS™ Perfusion Sleeves
4 pieces (sterile packed as 2x2 pieces)
專用試管
130-128-151
gentleMACS Perfusers
25 tubes (sterile, single-packed)
專用試劑
130-128-030
Liver Perfusion Kit, mouse and rat
for 25 preparations
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gentleMACS™ Perfusion Technology - 自動化離體灌注術新上市
2025-04-07
2026-04-07
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TIL 數量非常低,背景干擾訊號會丟失少量亞群,從而妨礙了免疫細胞群的分析實驗。腫瘤解離後 TIL 的分離大大提高了單細胞免疫分析靈敏度。
免疫療法已被證明具有臨床療效並具有巨大潛力,但只有一小部分患者可以體驗到實際的臨床益處。越來越有必要進行其他研究去改善實驗條件進而獲得有益的臨床結果。能夠穩定的分析抗腫瘤免疫力並監測治療對腫瘤微環境(包括腫瘤浸潤白細胞(TIL))的影響尤其重要。
但是,TIL 數量可能會非常低,並且當小的子群被背景訊號干擾時,它們可能會無法分析。在執行單細胞分析時,這尤其具有挑戰性。此外,單細胞分析的先決條件是存活率超過 80% 的無碎片單細胞懸液。圖 1 這裡,我們提供完整工作流程解決方案,包括組織存儲,腫瘤解離,死細胞去除和細胞分離可產生豐富的 T 和 B 細胞活力,從而顯著提高單細胞免疫族群分析結果。
通過流式細胞儀對 TILs 進行免疫分型顯示 T 和 B 細胞占比低
在分離的大塊腫瘤樣品中,僅 14% 的細胞是白細胞。使用適當的 Gating 策略,白細胞被進一步細分為 T 細胞、 B 細胞、嗜中性粒細胞、嗜酸性粒細胞和 NK 細胞。
磁珠分選 TIL 可提高單細胞受體定序和免疫分析的靈敏度
將冷凍的腫瘤細胞解凍並去除死細胞後進行單細胞免疫族群分析。
樣品中活細胞的百分比從死細胞去除前的僅 26% 增加到 80% 以上。去除死細胞後,使用REAlease® CD4/CD8(TIL)MicroBeads 將 T 細胞提升到 80% 以上(圖3)。
TIL clonality 是通過單細胞受體定序來評估的,可通過未分離的細胞 (Bulk) 或分離的 TIL 進行。比較證明,TILs 的磁珠分離提高了 RNA 定序的分辨率,突顯出了克隆型,否則其表現差強人意或完全沒有表現出來。在圖 4 中,代表了通過 RNA 定序在分離的 TIL 群體(紫色)中確定的前 50 個 TCRβ(A)和 BCR(B)CDR3 克隆型,以及相應的細胞數。紅條表示在 Bulk 樣本中顯示相同 TCRβ(A)和 BCR(B)CDR3 克隆型的細胞數量。
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<MACS®> REAlease® 技術分離 TIL 亞型如何提高 10x Cenomics 單細胞 TIL 受體定序的靈敏度
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