單細胞定序潮流來襲：Neonatal and adult astrocyte diversity quantified by single-cell mRNA sequencing

組織解離並製作具有高細胞活力和最少細胞碎片的單細胞懸液是可靠的細胞分析，細胞培養和細胞分離的前提。由於成年大腦的解離需要復雜的機械和酶處理才能成功分解緊密連接的神經細胞，因此細胞分析通常僅限於胚胎或新生囓齒動物組織。

為了將分析擴展到成年神經細胞，我們透過去除碎片和紅細胞的新方案進一步優化了該方法，這對於有效的神經細胞分離和培養非常重要。

標準化的過程可以使成年鼠腦組織快速而提高神經細胞被分離的再現性，並經過優化條件以增加活細胞的數量。Miltenyi Biotec 還建立了星形膠質細胞、少突膠質細胞、神經元、小膠質細胞和內皮細胞高純度磁分離的產品（MACS® 技術），並優化了培養條件以成功培養成年神經細胞群。

此外，對高度純化的星形膠質細胞進行單細胞 mRNA 測序分析，以鑑別新生兒和成人星形膠質細胞的多樣性。總而言之，我們提出了一種新型的標準化技術來獲得高度純化成年神經細胞，該技術將分析從幼鼠擴展到成年鼠腦組織（圖 A），並有助於進行複雜的細胞和分子分析（圖 B）。

神經組織解離相關試劑：

Order no.	Tissue dissociation kits	Starting material	Size	Note
Isolation of all neural cells				(P) Papain, (T) Trypsin
130-107-677	Adult Brain Dissociation Kit, mouse and rat	Animal age > P7	50test	只能用八通道帶加熱器機型此試劑本身就有包含debris remove buffer與紅血球裂解液
130-092-628	Neural Tissue Dissociation Kit (P)	Animal age ≤ P7	50test	可適用雙通道酵素用papaine
130-093-231	Neural Tissue Dissociation Kit (T)	Animal age ≤ P7	50test	可適用雙通道酵素用trypsin
Isolation of neurons only
130-094-802	Neural Tissue Dissociation Kit – Postnatal Neurons	Animal age ≤ P7	50test
Special applications
130-095-942	Brain Tumor Dissociation Kit (P)	Brain tumor tissue	25test	腦腫瘤組織專用
130-095-943	Neurosphere Dissociation Kit (P)	Cultured neurospheres	100test
130-096-348	Embryoid Body Dissociation Kit, human and mouse	In vitro generated embryoid bodies	50test
130-096-731	Myelin Removal Beads II, human, mouse, rat	Single-cell suspensions	200 µL	特異性去除隨鞘碎片需搭配分選柱與磁座
130-096-733			4 mL
130-096-433			2×4 mL
130-090-101	Dead Cell Removal Kit		1*10^9 total cell	特異性去除死細胞需搭配分選柱與磁座
130-042-401	LS Separation columns		25. columns	磁珠分選柱
130-042-201	MS Separation columns		25. columns	磁珠分選柱
130-098-463	MACS SmartStrainer, 100 µM		50 filters	細胞團塊過濾
130-098-458	MACS SmartStrainer, 30µM		50 filters	細胞團塊過濾
130-098-462	MACS SmartStrainer, 70 µM		50 filters	細胞團塊過濾
130-093-237	gentleMACS 25 C Tubes		25 Tubes 單支獨立包裝	搭配 gentleMACS 儀器一起使用
130-096-334	gentleMACS C Tubes (4x25 tubes)		4x25 tubes 25隻一包	搭配 gentleMACS 儀器一起使用

Gentle adult brain dissociation

Isolation of viable primary neural cells from adult murine brain tissue

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