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<MACS®> 單細胞定序潮流來襲:Neonatal and adult astrocyte diversity quantified by single-cell mRNA sequencing4
https://www.ancell-bio.com.tw/ 元昕實業有限公司
元昕實業有限公司 臺北市信義區松德路74號9樓
新品上市 《Cell Suspension Cleanup Kit, human (130-135-177)一步到位的樣品清潔方式》 單細胞定序對於上機樣本的潔淨程度有很高的要求,因此組織變成單細胞懸浮液後往往需要一系列樣品清潔步驟例如:紅血球裂解、碎片移除、死細胞移除等繁瑣步驟。 新推出的人細胞懸液淨化試劑盒(Cell Suspension Cleanup Kit, human以下簡稱CSCK)採用 MACS磁分選技術,將去除紅細胞、死細胞、細胞碎片,包括線粒體和游離細胞核等多個環節集合至單一步驟,全程僅需約40分鐘,比常規兩步法(RBC lysis+ Dead cell removal)節省近40%的時間,大幅提升實驗效率。更重要的是,無須使用劇烈的紅細胞裂解液,有效避免細胞應激和轉錄本擾動,最大程度保留細胞真實的轉錄狀態。 CSCK試劑採用磁珠方式去移除解離後細胞懸浮液中的雜質包含凋亡細胞、死亡細胞、紅血球 (RBC) 和游離胞器等。將細胞懸浮液與試劑中磁珠混合進行磁性標記,然後通過分選柱。磁性標記的不需要的細胞和細胞器會被截留在柱內,而未標記的活細胞則會穿過柱子。 ++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ Miltenyi biotec科學家團隊在內部測試中,使用gentleMACS™ Octo八通道帶加熱全自動組織解離器結合腫瘤解離試劑盒,從5份新鮮的高級別漿液性卵巢癌(HGSOC)樣本製備了單細胞懸液,隨後比較了使用CSCK處理前後的狀態。結果顯示相關品質參數得到全面提升,處理後樣本完全符合單細胞測序要求: ✅ 活細胞比例從52%提升至77% ✅ 紅細胞含量從>50%降至6.8% ✅ 線粒體代表的游離細胞器污染從>30%降低至7.4% ✅ 有核活細胞的整體占比從37%大幅提升至89% 圖1 CSCK處理改善了來自新鮮HGSOC的細胞懸液品質(n=5)。Ori,未處理細胞懸液。CSCK,CSCK淨化後細胞懸液。虛線代表10x Genomics單細胞上機的推薦閾值 隨後美天旎科學家對其中3份新鮮樣本的CSCK處理前後細胞懸液進行了單細胞轉錄組測序,結果表明樣本淨化直接轉化為更高品質的測序數據: – 有效barcode比例提升,減少測序錯誤; – reads更集中於轉錄組區域,基因間區噪音顯著減少; – 紅細胞相關基因(HBB+)和線粒體reads干擾顯著降低。 最終,經CSCK處理的樣本在UMAP視覺化中呈現出更清晰的細胞分群,能夠準確識別稀有亞群,為下游生物學分析提供更可靠的基礎。 圖3 CSCK處理提升了新鮮HGSOC樣本單細胞轉錄組測序品質(n=3)。 圖4 CSCK處理後細胞懸液在單細胞轉錄組測序中清晰分群(A),且相比未處理樣本的HBB+(B)和線粒體reads(C)干擾顯著降低(n=3)。 請特別注意,人細胞懸液純化試劑盒(CSCK)與降解糖蛋白 A 的消化酶不相容,所以下面解離試劑盒所產生的細胞懸浮液不適用這組清潔試劑: –Brain Tumor Dissociation Kit (P), human (130-095-942) –Umbilical Cord Dissociation Kit, human (130-105-737) –Embryoid Body Dissociation Kit, human and mouse (130-096-348) –Whole Skin Dissociation Kit, human (130-101-540) –Multi Tissue Dissociation Kit 2 (130-110-203) 123 https://www.ancell-bio.com.tw/hot_530568.html 新品上市- Cell Suspension Cleanup Kit, human (130-135-177)一步到位的樣品清潔 2026-02-23 2027-02-23
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組織解離並製作具有高細胞活力和最少細胞碎片的單細胞懸液是可靠的細胞分析,細胞培養和細胞分離的前提。由於成年大腦的解離需要復雜的機械和酶處理才能成功分解緊密連接的神經細胞,因此細胞分析通常僅限於胚胎或新生囓齒動物組織。

為了將分析擴展到成年神經細胞,我們透過去除碎片和紅細胞的新方案進一步優化了該方法,這對於有效的神經細胞分離和培養非常重要。

標準化的過程可以使成年鼠腦組織快速而提高神經細胞被分離的再現性,並經過優化條件以增加活細胞的數量。Miltenyi Biotec 還建立了星形膠質細胞、少突膠質細胞、神經元、小膠質細胞和內皮細胞高純度磁分離的產品(MACS® 技術),並優化了培養條件以成功培養成年神經細胞群。

此外,對高度純化的星形膠質細胞進行單細胞 mRNA 測序分析,以鑑別新生兒和成人星形膠質細胞的多樣性。總而言之,我們提出了一種新型的標準化技術來獲得高度純化成年神經細胞,該技術將分析從幼鼠擴展到成年鼠腦組織(圖 A),並有助於進行複雜的細胞和分子分析(圖 B)。

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神經組織解離相關試劑:

Order no. Tissue dissociation kits Starting material Size Note
Isolation of all neural cells (P) Papain, (T) Trypsin
130-107-677  Adult Brain Dissociation Kit, mouse and rat Animal age > P7 50test 只能用八通道帶加熱器機型 此試劑本身就有包含debris remove buffer與紅血球裂解液
130-092-628  Neural Tissue Dissociation Kit (P) Animal age ≤ P7 50test 可適用雙通道 酵素用papaine
130-093-231  Neural Tissue Dissociation Kit (T) Animal age ≤ P7 50test 可適用雙通道 酵素用trypsin
Isolation of neurons only
130-094-802 Neural Tissue Dissociation Kit – Postnatal Neurons Animal age ≤ P7 50test  
Special applications
130-095-942 Brain Tumor Dissociation Kit (P) Brain tumor tissue 25test 腦腫瘤組織專用
130-095-943 Neurosphere Dissociation Kit (P) Cultured neurospheres 100test  
130-096-348 Embryoid Body Dissociation Kit, human and mouse In vitro generated embryoid bodies 50test  
 130-096-731 Myelin Removal Beads II, human, mouse, rat Single-cell suspensions 200 µL 特異性去除隨鞘碎片 需搭配分選柱與磁座
130-096-733  4 mL 
 130-096-433  2×4 mL
130-090-101 Dead Cell Removal Kit   1*10^9 total cell 特異性去除死細胞 需搭配分選柱與磁座
130-042-401 LS Separation columns   25. columns 磁珠分選柱
130-042-201 MS Separation columns   25. columns 磁珠分選柱
130-098-463 MACS SmartStrainer, 100 µM    50 filters  細胞團塊過濾
130-098-458 MACS SmartStrainer, 30µM    50 filters  細胞團塊過濾
130-098-462 MACS SmartStrainer, 70 µM    50 filters  細胞團塊過濾
130-093-237 gentleMACS 25 C Tubes

25 Tubes
單支獨立包裝

搭配 gentleMACS 儀器一起使用
130-096-334 gentleMACS C Tubes (4x25 tubes) 4x25 tubes
25隻一包
搭配 gentleMACS  儀器一起使用


Gentle adult brain dissociation
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Isolation of viable primary neural cells from adult murine brain tissue

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