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新品上市
《Cell Suspension Cleanup Kit, human (130-135-177)一步到位的樣品清潔方式》單細胞定序對於上機樣本的潔淨程度有很高的要求,因此組織變成單細胞懸浮液後往往需要一系列樣品清潔步驟例如:紅血球裂解、碎片移除、死細胞移除等繁瑣步驟。
新推出的人細胞懸液淨化試劑盒(Cell Suspension Cleanup Kit, human以下簡稱CSCK)採用 MACS磁分選技術,將去除紅細胞、死細胞、細胞碎片,包括線粒體和游離細胞核等多個環節集合至單一步驟,全程僅需約40分鐘,比常規兩步法(RBC lysis+ Dead cell removal)節省近40%的時間,大幅提升實驗效率。更重要的是,無須使用劇烈的紅細胞裂解液,有效避免細胞應激和轉錄本擾動,最大程度保留細胞真實的轉錄狀態。
CSCK試劑採用磁珠方式去移除解離後細胞懸浮液中的雜質包含凋亡細胞、死亡細胞、紅血球 (RBC) 和游離胞器等。將細胞懸浮液與試劑中磁珠混合進行磁性標記,然後通過分選柱。磁性標記的不需要的細胞和細胞器會被截留在柱內,而未標記的活細胞則會穿過柱子。
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Miltenyi biotec科學家團隊在內部測試中,使用gentleMACS™ Octo八通道帶加熱全自動組織解離器結合腫瘤解離試劑盒,從5份新鮮的高級別漿液性卵巢癌(HGSOC)樣本製備了單細胞懸液,隨後比較了使用CSCK處理前後的狀態。結果顯示相關品質參數得到全面提升,處理後樣本完全符合單細胞測序要求:
✅ 活細胞比例從52%提升至77%
✅ 紅細胞含量從>50%降至6.8%
✅ 線粒體代表的游離細胞器污染從>30%降低至7.4%
✅ 有核活細胞的整體占比從37%大幅提升至89%
隨後美天旎科學家對其中3份新鮮樣本的CSCK處理前後細胞懸液進行了單細胞轉錄組測序,結果表明樣本淨化直接轉化為更高品質的測序數據:
有效barcode比例提升,減少測序錯誤;
reads更集中於轉錄組區域,基因間區噪音顯著減少;
紅細胞相關基因(HBB+)和線粒體reads干擾顯著降低。
最終,經CSCK處理的樣本在UMAP視覺化中呈現出更清晰的細胞分群,能夠準確識別稀有亞群,為下游生物學分析提供更可靠的基礎。

圖3 CSCK處理提升了新鮮HGSOC樣本單細胞轉錄組測序品質(n=3)。

圖4 CSCK處理後細胞懸液在單細胞轉錄組測序中清晰分群(A),且相比未處理樣本的HBB+(B)和線粒體reads(C)干擾顯著降低(n=3)。
請特別注意,人細胞懸液純化試劑盒(CSCK)與降解糖蛋白 A 的消化酶不相容,所以下面解離試劑盒所產生的細胞懸浮液不適用這組清潔試劑:
Brain Tumor Dissociation Kit (P), human (130-095-942)
Umbilical Cord Dissociation Kit, human (130-105-737)
Embryoid Body Dissociation Kit, human and mouse (130-096-348)
Whole Skin Dissociation Kit, human (130-101-540)
Multi Tissue Dissociation Kit 2 (130-110-203)
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