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<CYTENA> 新型微量生物反應器 - 加速生醫製藥及細胞株開發4
https://www.ancell-bio.com.tw/ 元昕實業有限公司
元昕實業有限公司 臺北市信義區松德路74號9樓
《組織透明化-使整個生物樣本變得透明》 組織本身是不透明的,因此光線在穿過碳水化合物、蛋白質、脂質和其他色素分子等不同成分時會發生散射。組織透明化透過使整個組織透明化來解決這個問題。這使得科學家能夠看到整個樣本的結構和相互作用,而不僅僅是一小片樣本。 傳統上,科學家會將組織切成薄片,以便在顯微鏡下進行研究。然而,這種方法可能會損壞精細的結構並扭曲細胞的自然 3D 排列,導致組織形態的 3D 構建不準確。組織透明化允許研究人員對整個組織進行完整成像,從而避免了這些問題。 組織透明化方案的多樣性反映了適應特定應用(物種、組織類型)和所需染料(螢光蛋白、抗體標記)的需要。由於每個方案對樣品製備和程序都有特定的要求,因此選擇正確的方案可能是一項複雜而艱鉅的任務。為了簡化這個決策過程,我們將組織透明化方法分為三大類:1.有機溶劑形式的組織透明化 大多數有機溶劑透明化程序都有一個簡單的三步驟機制: 脫水:使用乙醇或乙醚去除組織水分。 脫脂:用有機溶劑去除脂質。 折射率 (RI) 匹配:建立均勻的折射率以實現透明度。 有機溶劑清除快速、高效、廉價。它可以產生高度透明的樣品,是腫瘤、成人組織或高度髓鞘化大腦等緻密組織的理想選擇。例如: iDISCO、uDISCO、3DISCO、BABB 方法和 MACS® Clearing Kit。  2.水基(親水性)組織透明化 此類別涵蓋多種利用水溶性分子進行透明化和折射率 (RI) 匹配的方案。其中一種方式是在碳水化合物溶液(例如 Scale、CUBIC)中進行 RI 匹配之前使用不同洗滌劑濃度和超水合溶液的延長孵育過程對組織進行脫脂。與在蔗糖或FRUIT等純碳水化合物溶液中孵育相比,這種組合的去污劑和超水合方法在脫脂和組織清潔方面要有效得多。脫脂過程引起的過度水合作用也會導致組織腫脹。這種腫脹可能是一把雙面刃:它會使組織變軟且容易受損,但它也有利於擴張組織的成像。 3.水凝膠包埋 水凝膠嵌入用於在脫脂過程中保持組織完整性,也可以使用儀器加速脫脂。水凝膠方案與內源性螢光蛋白和抗體相容。然而,這種方法有缺點。初始設備投資可能很昂貴,而且執行該技術對於初學者來說極具有挑戰性。   【有機溶劑型組織清潔效果最佳試劑-MACS® Clearing Kit】 MACS® Clearing Kit能夠對不同組織進行免疫染色和清除,以進行後續的三維 (3D) 成像分析。使用 MACS® Clearing Kit 開發了特定方案,可輕鬆、快速、有效地對不同組織(例如小鼠大腦半球、腦類器官和人類腫瘤)進行免疫染色和清除。透明化後,可以使用不同的顯微鏡系統對組織進行分析,例如光片螢光顯微鏡、共焦或雙光子顯微鏡。 MACS® Clearing Kit 提供用於不同組織的免疫染色和透明化的試劑。簡而言之,在免疫染色之前先對樣品進行固定和透化。免疫染色步驟的持續時間取決於組織。免疫染色後,使用一系列乙醇稀釋液對組織進行脫水,然後進行處理使其透明(澄清)。透明組織可在不同的顯微鏡系統中使用,例如: MACS® UltraMicroscope對透明組織進行分析。     各類組織透明化所需時間:   各類組織透明化實驗流程: 針對下面幾種組織,Miltenyi biotec 提供透明化流程建議 Mouse brain hemispheres Mouse brain hemispheres with preservation of endogenous fluorescent protein signal Organoids and spheroids Organoids and spheroids (high-throughput) Human (blood-rich) tumors and xenografts Mouse lung/intestine Mouse lymph nodes Mouse spleen, kidney, and liver Mouse embryo 123 https://www.ancell-bio.com.tw/hot_508707.html 3D組織透明化 2025-04-07 2026-04-07
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相關連結:https://www.cytena-bps.com/single-cell-expansion/

微量生物反應器 (microbioreactor) 可以將 liter 規模以上的大型生物反應器 (bioreactor),轉換到 96-well  24-well plate 進行小體積培養和初步篩選,在細胞株開發 (CLD) 領域常用的 CHO cell 系列有極佳的細胞生長和蛋白表現,有效加速細胞培養時程。除了 CHO cell line 系列應用於細胞株開發外,也可應用於hybridomaJurkat (human T cell line)Yeast3D/spheroidHEK293 (adherent type) 等。

近年來,科學家開始研究單細胞 (single-cell) 以觀察個體細胞之間的微小變化,期望找出傳染病、癌症、神經性退化等疾病的病因,進而開發更好的藥物來治療或預防疾病的發生。然而,最主要挑戰在於細胞株培養環境複雜,往往耗費大量人工及時間流程。例如遇上 COVID-19 病毒來襲,如何加速培養細胞產生細胞株抗體,進而成功開發生物疫苗就相當重要。

以下是目前主要販售的兩種機型,提供你們參考

C.BIRD™ 微量生物反應器 是市場上第一台結合早期細胞株篩選以及監測的微生物反應器,提供製藥公司及研究機構新的生物製程解決方案,幫助生物製藥流程有限縮短時間、節省耗材成本及人力成本,進一步幫助藥廠加速製藥流程,使有醫療需求的患者能夠更早期得到相對應且更有效的治療。

S.NEST™ 微量生物反應器 能改變生物製藥藥廠以往培養細胞的模式,因為過去培養單一細胞往往需要數個月讓細胞成長,之後才能逐一選擇最強壯的細胞進行後續量產。運用此技術就能在早期判斷哪些細胞最適合做後續研究,有效提升實驗室研究量能、減少重複工作、甚至縮短生物疫苗這類新藥的開發時間。

這款反應器有幾項獨特設計,
其一是 培養槽具有單獨的環境設置,可達到精準控制的培養箱並進行監測。
其二是 配有4組適合24孔或96孔培養盤的空間,可同時最多培養384個樣品的高通量環境,並且是在環境均勻狀態下讓細胞穩定成長。
其三是 搭配光學相機模組,在細胞生長過程隨時針對pH值、溶氧量等指標進行監測。

C.NEST™ 微量生物反應器 是一種高通量細胞培養系統,在一個系統中具有四個培養槽,最多可同時進行 8 個靜態培養板或最多 4 個動態培養。若客戶有更高通量的相關需求,C.NEST 可增加層數以提升培養環境的數量,一次最多可同時培養於 16 個培養槽。 C.NEST 對每個培養槽的溫度和二氧化碳都能進行獨立控制,以執行濕度監測和紫外線殺菌。C.NEST 可以實現自動化,以便於操作並與機械手臂整合,以實現對於自動化有需求的藥廠或研究機構。

更多 application notes 可參考 https://www.cytena-bps.com/application-note/1a6b95d5e315a26934ea5f520c824fd1.png

傳統靜態培養,會使細胞代謝物及二氧化碳沉積於 well 底部,而氧氣也不容易進入到 medium 裡,導致細胞生長效率降低。如將培養液不斷進行混合,可使營養成分均勻分布,氧氣較容易進入培養液內,並將細胞帶到 3D 培養環境,模擬生物體內生長狀態。

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系統運作原理,是以專利設計的上蓋並結合控制系統,將 96-well 24-well 內的培養液不斷進行混合,有如對孔盤進行 multi-pipetting

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96-well format 下進行連續五天的 CHO-K1 細胞培養, mixing culture 無論於細胞生長及蛋白表現皆顯著優於傳統靜態培養。

 

CYTENA BPS portfolio:

Model

Culture format

Working volume

Capacity

Mixing rate

Environmental control

DO/pH monitoring

C.BIRD

96-well, 24-well

96-w: 150-200 µl
24-w: 1,000-1,600 µl

3 culture plates

15s - 50s / cycle

 

 

S.NEST

24-well **

96-w: 150-200 µl
24-w: 1,000-1,600 µl

4 culture plates

10s-50s / cycle

X

X

C.NEST

96-well, 24-well

96-w: 150-200 µl
24-w: 1,000-1,600 µl

4 x 4 culture plates

10s-50s / cycle

X

 

 

** S.NEST 96-well format將於 2023 年 1 月 launch


C.BIRD Flyer

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S.NEST Flyer

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C.NEST Flyer

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