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使用 iPSC 衍生的多巴胺能神經元進行首次人體臨床試驗以治療帕金森病
Daisuke Doi 博士在日本京都 iPS 細胞研究與應用中心（CiRA）擔任助理教授，並積極參與由 Jun Takahashi 博士領導的臨床試驗計劃。該實驗室正在開發一種基於 iPSC 衍生的多巴胺能前驅細胞的新細胞療法，用於治療帕金森病。在建立同種異體 iPSC 細胞系（來自 HLA 相合供體）和神經誘導後，他們必須對 Corin 陽性神經祖細胞進行分類，以最終獲得進一步培養所需的高純度靶細胞群。在臨床前工作期間，他們使用傳統的液滴分選機對這些細胞進行分選。 Corin 陽性神經祖細胞分化為多巴胺能祖細胞，最終移植到帕金森病患者體內。研究人員在細胞分選後獲得了良好的純度，但細胞製造過程的後續階段受到細胞活力差的阻礙，導致最終細胞產品的產率低。此外，細胞分選過程需要大量的手動操作。 Doi 博士解釋說“當使用傳統的基於液滴的系統時，我們每 10 分鐘手動更換一次分選瓶，連續 16 小時；這對於可行的治療來說是不切實際的”。為此，他們開始尋找替代的細胞分選解決方案。
MACSQuant Tyto 細胞分選儀，以其基於微芯片的溫和分選原理、密閉無菌的濾芯和 GMP 級耗材，似乎是完美的解決方案。事實上，Doi 和他的同事驚訝地發現，在 MACSQuant Tyto 細胞分選儀上分選的細胞分選後存活率要高得多，而在純度和產量方面與在傳統液滴分選儀上分選的細胞相似。通過球體大小和軸突延伸測定進一步確認了這個觀察，進行這些測定以獲得細胞質量及其移植物存活能力的指示。除了更好的細胞存活率之外，Tyto 最終細胞產品的總產量也更高。 “使用 MACS GMP Tyto Cartridge 和 MACSQuant Tyto Cell Sorter，我們能夠將細胞生產時間縮短三分之一併提高產量。”簡而言之，借助 MACSQuant Tyto 細胞分選儀及其符合 GMP 的耗材，包括監管機構批准臨床試驗的大量文件，Doi 和他的同事能夠在更短的時間內生產更多的細胞產品，從而使治療能夠更快到達患者床邊。
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個性化醫療的下一個里程 ~ 用抗原特異性 T 細胞對抗多種癌症實體
Ali Mohamed 在 Immatics（美國）工作，這是一家專注於 T 細胞癌症免疫療法的臨床階段生物製藥公司。他們目前的專案之一是 ACTolog® 多目標試點研究。 ACTolog® 是一種使用患者自身（自體）T 細胞的過繼細胞療法（ACT）。這項研究非常令人興奮，因為這是第一次不僅針對一種腫瘤類型，而且針對多種腫瘤類型。但是 Immatics 如何為多種癌症類型提供如此特殊的治療方法呢？最初，在產生個人化細胞療法之前，從新鮮的腫瘤活檢中測試腫瘤抗原表達（對每個腫瘤具有特異性）。在此期間選擇生物標誌物分析腫瘤靶標。在此之後，使用 MACSQuant Tyto 從患者體內分離目標特異性 T 細胞。在隨後的 T 細胞啟動和擴增階段，腫瘤特異性 T 細胞擴增到細胞治療所需的數量。現在，T 細胞已準備好重新註入患者體內，專門對抗惡性細胞。Ali Mohamed 對 Immatics 臨床試驗GMP 製造中使用TYTO分選患者抗原特異性 T 細胞的易用性、性能和封閉無菌盒系統表示讚賞。Mohamed 說 “溫和的、基於微芯片的分選機制可以在將患者的寶貴細胞轉移到培養容器進行擴增之前保持其高活力，”。這項研究表明，MACSQuant Tyto 甚至可以提供 GMP 規格耗材促進個性化治療在 GMP 環境中進行。重要的是，分選後細胞的功能得以保留，這對於有效消除患者體內的腫瘤細胞至關重要。
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拓寬流式細胞術核心的應用範圍
Marissa Fahlberg 是美國杜蘭國家靈長類動物研究中心 (TNPRC) 流式細胞術核心的助理主任。 TNPRC 致力於人類和動物健康的研究，重點是開發傳染病的治療方法、疫苗和診斷工具。 TNPRC 的流式細胞術核心設施為研究所的使命做出了貢獻，並讓研究員經常光顧。 TNPRC 核心科學家以及許多附屬科學家在這裡得到支持，因此對各種細胞類型和應用的靈活性和經驗的需求很高。 Flow 核心設施不斷適應這些高要求，不僅提供優質服務，而且關注最先進的技術。 MACSQuant Tyto 是他們設備的最新成員，以其高度的靈活性贏得了一席之地，從傳統的細胞類型（如 NK 細胞、B 細胞和 T 細胞）到更稀有或高級的類型（例如濾泡細胞）輔助性 T 細胞和粘膜幹細胞）。
Fahlberg 還指出，“微流控芯片提供了極其簡單的設置，同時也消除了像傳統細胞分選儀一樣，流體問題或堵塞會導致長時間延遲或噴灑的擔憂”。 MACSQuant Tyto 以“walk-away”的方式進行分類，緩解核心設施工作人員繁忙的環境和排滿的日程。 TNPRC 的流式細胞術核心設施也有一個 BSL3 實驗室，用於分選生物危害樣品。生物危害材料（例如受感染的樣本）的細胞分選是一項挑戰，必須採取預防措施，例如將傳統的液滴分選機放置在佔用空間的安全櫃中，以及耗時的淨化流程。值得注意的是，使用 MACSQuant Tyto 進行細胞分選僅在完全封閉的無菌盒中進行，從而降低了操作員感染性顆粒氣霧化的危險。 MACSQuant Tyto 細胞分選機的靈活性、易用性、封閉、無菌和無氣溶膠分選過程補足了 Flow Core Facility 設備性能，排除了氣溶膠的問題為分選應用打開了另一扇大門。
罕見的 SARS-CoV-2 特異性 B 細胞的分選
帕特里克·威爾遜是芝加哥大學的醫學教授和抗體生物學實驗室的首席研究員。他的團隊致力於對潛在 B 細胞反應的基本理解，以及確定抗體的特異性和活性。由此獲得的知識可用於轉譯醫療，例如直接療法或疫苗設計。在他們最近的一項研究中，Patrick Wilson 和他的團隊與一個國際研究團隊合作，通過使用高通量 B 細胞分选和測序平台來研究康復期 COVID-19 患者的 B 細胞反應。相應的發現為研究 B 細胞對 SARS-CoV2 或疫苗接種的反應提供了一個全方位工具。
為了對這種罕見的抗原特異性 B 細胞群進行分類，Wilson 的團隊利用了 MACSQuant Tyto。他們利用源自 SARS-CoV-2 的 PE 偶聯抗原探針來標記特定的 B 細胞。值得注意的是，抗原特異性 B 細胞的頻率僅為 0.26%（Wilson 等，2020）。得益於 MACSQuant Tyto 的無氣溶膠分選機制，以及封閉的無菌盒系統，他們能夠在校園的流式細胞儀設施中分選 BSL2+ 材料，而無需採取進一步的預防措施。Wilson 宣稱 “低壓和溫和的微芯片分選機制保持了高細胞活力，這使我們能夠輕鬆地對非常稀有的細胞群進行 10x Genomics™”。NGS測序技術非常敏感，需要高質量的樣本以最大限度地減少測序人工誤差。MACSQuant Tyto 的溫和分選機制可通過分選具有高活力的細胞來滿足這些要求。
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在 BSL1 級別實驗室中毫無顧慮地對生物危害材料進行分類
Mariane Schleimann 是丹麥奧胡斯大學醫院的專案經理和博士後。大學醫院的研究優勢在於貼近患者，以及醫生和科學家間的合作。以前主要專注於 HIV 相關研究，Mariane 和她的同事開始研究利用中和抗體治療 COVID-19 的新方法。目前，他們主要使用 MACSQuant Tyto 來分選 COVID-19 患者的 B 細胞。隨後，他們從這些 B 細胞中提取 DNA，並通過 PCR 擴增抗體基因序列。這些序列可用於產生感興趣的抗體，最終測試它們中和病毒的能力。
他們使用與螢光團偶聯的刺突蛋白對病毒特異性 B 細胞進行分類。Schleimann 解釋說，“能夠依靠封閉、無菌的容器對我們的工作非常有用：分選本身就是造成安全問題的原因，也是最關鍵的部分。對於傳統的液滴分選機，需要一個佔用空間的安全櫃，並且由於分選過程會產生氣溶膠，分選應在 BSL3 房間進行。相比之下，該小組在 BSL1 實驗室中安裝並使用了 MACSQuant Tyto 細胞分選儀。 Schleimann 還指出，使用 MACSQuant Tyto 不需要深入培訓。 “一旦設置完畢，實驗室經理就可以接受培訓以輕鬆使用它：他們不需要所有的流式細胞儀背景知識，”Schleimann 說。總之，這個研究項目突顯了在封閉和無菌系統中分選的好處，從而不僅為樣品提供安全，也為實驗室工作人員提供安全。
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通過溫和的細胞分選改善您的NGS測序結果
Quy Nguyen 在加州大學歐文分校 (UCI) Kai Kessenbrock 博士的實驗室完成博士論文後，最近轉到 UCI 的基因組學核心設施，在那裡他參與研究設計和執行他們的基因組學工作流程。在他的博士論文中，他的工作重點是在單細胞水平上分析小鼠乳腺上皮的細胞多樣性，以確定在乳腺癌發生和進展過程中發生的變化。上皮細胞的分類是此工作流程的基礎，因為乳腺具有非常複雜的細胞組成，包括許多不同的細胞類型。從乳腺製備成單細胞懸液後，會使用傳統液滴分選儀或 MACSQuant Tyto 細胞分選儀對上皮細胞進行分選。
為了研究細胞異質性，Nguyen 隨後使用了 10x Genomics 平台。 Nguyen 觀察到，通過傳統液滴分選機分選的細胞和使用 MACSQuant Tyto 分選的細胞之間的細胞類型相同。然而，在隨後的轉錄組分析中，從 MACSQuant Tyto 上分選的細胞中捕獲了更多基因讀數，表明樣本質量更好。此外，與使用 MACSQuant Tyto 進行的溫和分選相比，使用傳統的液滴分選機分選導致壓力反應基因的上升。最後，在進行乳腺球形成分析以測試細胞功能時，Nguyen 還觀察到使用 MACSQuant Tyto 分選的細胞具有更高的細胞生長率。總之，Quy Nguyen工作結果令人印象深刻的表明，使用 MACSQuant Tyto 進行細胞分選顯著提高了基因組學樣本的質量，也提高了功能分析的質量。
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<MACS®> MACSQuant®Tyto® 細胞分選儀 - 用戶經驗分享
2024-04-29
2025-04-29
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